D-熒光素是螢火蟲螢光素酶 (Firefly luciferase) 的常用底物,能夠在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下通過螢火蟲螢光素酶的催化作用進行氧化脫羧反應發出波長約為560nm的藍綠色生物螢光(bioluminescence),當熒光素過量時,產生的光量子數與熒光素酶的濃度呈正相關性,可以通過化學發光儀或液閃測定儀測定生物熒光。D-熒光素可用作基于熒光素酶(EC 1.13.12.7)的生物發光成像和基于細胞的高通量篩選應用的底物,也可作為D-熒光素和螢火蟲熒光素酶組成的試劑用于ATP的測量;D-熒光素還被廣泛應用于基于螢火蟲螢光素酶的報告基因檢測,包括表達螢火蟲螢光素酶的細胞和組織樣品裂解液的檢測,以及表達螢火蟲螢光素酶動物的活體成像分析和培養細胞的體外生物發光分析。
目前市場上有三種產品形式,D-熒光素(游離酸),D-熒光素鈉鹽,以及D-熒光素鉀鹽。這三種產品溶解特性有所差異,D-熒光素(游離酸)水溶性很弱,除非溶于弱堿如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/mL)和DMSO(50 mg/mL)。但D-熒光素鈉鹽和D-熒光素鉀鹽易溶入水或者緩沖液中,使用方便。
室溫運輸。-20℃干燥避光保存,有效期2年。
易溶于水(30 mg/mL)。
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。
2. 本產品保存和操作的過程中都要避光。另外水溶性儲存液過濾除菌后,可以-20℃或-80℃分裝凍存,避免反復凍融。如果有條件,對儲存液充氮氣或氬氣(防止氧化),穩定性和保存時間更長。
3. 注射方式,動物類型以及體重等都會影響信號的發射,因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線, 確定最佳信號平臺期和最佳的檢測時間。
4. 鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性,鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響,溶解D-熒光素鈉鹽應使用無鈣鎂離子的PBS,且要完全溶解。
5. D-熒光素鈉鹽可?于任何現有的報告基因檢測或 ATP 檢測系統。如果檢測 ATP,需要戴?套和使?不含 ATP 的容器,且使用不含ATP的無菌水,盡量減少所有可能的 ATP 污染源。
6. 安全說明:避免吸入和接觸皮膚,眼睛及衣物;材料可能略微具有刺激性。
7. 急救措施:若吸入后:請移至空氣新鮮處,如果呼吸困難,給輸氧,如呼吸停止,給予人工呼吸;
若皮膚接觸后:用大量的水沖洗,移除污染的衣服和鞋子;
若眼睛接觸后:檢查并取下隱形眼鏡,并用大量的水沖洗;呼叫醫生;
若吞食后:用大量純凈水漱口;呼叫醫生。
8. 使用時請注意雙手及眼睛防護,注意佩戴耐化學腐蝕的橡膠手套和化學安全護目鏡。
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